Невынашивание беременности на ранних сроках является одной из актуальных проблем в акушерстве и гинекологии. По статистике 15–20% беременностей сроком до 12 недель могут спонтанно прерваться.
Такая же проблема встречается не только при естественном зачатии, но и при ЭКО (экстракорпоральном оплодотворении). Даже при тщательном отборе эмбрионов, средняя рождаемость в первом цикле ЭКО достигает 30–35%.
Причины невынашивания
Почему беременность прервалась в конкретном случае, порой трудно сказать даже специалистам. Зачастую может быть несколько причин, препятствующих развитию беременности:
- Проблемы со здоровьем у женщины (патология эндометрия, гормональные нарушения, синдром истощения яичников, патология маточных труб, скрытые инфекции, аутоиммунные нарушения, отсутствие ответа на стимуляцию при ЭКО).
- Нарушение менструального цикла.
- Гормональные причины, дисбаланс по половым гормонам (стероидам), в результате чего эмбрион не может полноценно имплантироваться в стенку матки.
- Возраст пациентки. У возрастных женщин заметно снижен резерв яичников.
- Другие факторы (деонтологические и ятрогенные).
Специалисты в области репродуктивной медицины все же выявили ведущую причину раннего прерывания беременности, которая заключается в генных мутациях, а именно ― анеуплоидии и полиплоидии.
При генетическом анализе спонтанных абортов в 50–60% случаев выявляют именно генные мутации.
Генетический анализ, для чего нужен?
Не секрет, что вся биологическая информация о живом организме «закодирована» в его уникальном геноме ― определенных последовательностях ДНК. Генетический скрининг помогает выявить генетические «поломки» как у будущих родителей, с целью выявления потенциальных рисков у малыша, так и у замершего эмбриона.
Если произошел самопроизвольный выкидыш или замершая беременность, абортированный материал направляют в лабораторию для цитогенетического анализа. Это делают чтобы:
- Установить причины прерывания беременности.
- Выявить повреждения и мутации в генах.
- Оценить состояние хромосом.
- Определить наследственную предрасположенность к каким–либо заболеваниям для дальнейшего планирования беременности.
Стандартная цитогенетика
Результаты многочисленных генетических анализов спонтанных абортусов подтверждают факт, что в большинстве своем (в 50–60% случаев) хромосомные мутации играют в этом процессе важную роль.
Однако некоторые хромосомные мутации остаются невыясненными при цитологическом исследовании абортированного материала. Почему так происходит?
При стандартных методах кариотипирования нельзя исключить влияние некоторых факторов, которые снижают эффективность и достоверность цитогенетического исследования:
- низкая клеточная пролиферативность;
- смешивание исследуемых клеток с клетками женщины;
- ограниченное разрешение световых микроскопов при выявлении микроструктурных аберраций хромосом.
На сегодняшний день в арсенале генетиков есть молекулярно–цитогенетические технологии, позволяющие решить многие проблемы в репродуктивной медицине.Так, одними из распространенных методов генетического анализа являются наиболее востребованные флуоресцентные методы:
- FISH метод;
- CGH метод.
В FISH методе используют специальные короткие последовательности ДНК ― ДНК–зонды, которые метят флуоресцентной меткой. Зонды соединяются связываются с комплиментарными участками ДНК в исследуемой ткани. Благодаря тому, что зонды помечены, гибридные участки в составе интересующих генов в молекуле ДНК или хромосом выдают свечение и становятся хорошо различимы.
FISH выявляет многие хромосомные аберрации (делеции, дупликации, инверсии, транслокации) с изменением структуры хромосом, а также трисомии по 21, 18, 13 хромосомам.
Несмотря на все достоинства, у FISH метода есть значимый недостаток: ДНК–зонды могут связываться только с одним участком генома, что ограничивает численность копий, которые можно определить в течении одного исследования.
Поэтому перед тем, как назначить FISH анализ, врач должен четко описать клиническую ситуацию, иначе придется повторять анализ в отношении сходных синдромов, что далеко не всегда приносит нужный результат.
aCGH метод ― новая эра в мире в цитогенетике
Альтернативой FISH методу ― является метод сравнительной геномной гибридизации CGH, анализирующий кариотип сразу на все хромосомные аберрации.
CGH анализ выявляет генетический материал в сотнях тысяч точек генома, благодаря чему диагностируются практически все известные микроделеционные, микродупликационные синдромы.
Новые возможности для молекулярного и виртуального кариотипирования клеток эмбриона открыло усовершенствование cgh метода с использованием ДНК–микрочипов (array–CGH).
Метод CGH - когда нужно делать анализ эмбриона
aCGH анализ выявляет анеуплоидии и хромосомные отклонения одновременно в нескольких хромосомах, которые не идентифицируются при стандартном кариотипировании. Список показаний метода aCGH:
- исследование эмбриона до имплантации;
- пренатальное исследование;
- обследование при невынашивании беременности;
- постнатальное обследование.
Как делают aCGH анализ
Метод aCGH основан на принципе сравнения двух образцов генетического материала: один образец берут от здорового человека, второй ― исследуемый.
При помощи зондов образцы метят и наносят на микрочип с последовательностями нуклеотидов. После чего оценивают интенсивность посылаемых сигналов: зеленый свет говорит о потери участка, красный ― увеличении.
Для aCGH анализа разработана специальная компьютерная программа, которая выдает результат в графической форме.
Преимплантационная диагностика эмбриона методом aCGH
Эмбрионы с генными мутациями, на любом этапе могут остановиться в развитии, тогда исход для беременности предопределен ― может произойти замершая беременность или спонтанный аборт (выкидыш).
Исследование эмбриона перед имплантацией методом сравнительной геномной гибридизации aCGH, помогает обнаружить любые генетические мутации и предупредить самопроизвольный аборт или развитие нездорового эмбриона:
- синдром Дауна;
- синдром Эдвардса;
- синдром Шерешевского–Тернера;
- другие хромосомные патологии, которые сочетаются с умственной или физической отсталостью, пороками развития.
Главное преимущество aCGH метода в том, что он позволяет полностью проанализировать эмбрион и отобрать самый здоровый и качественный из всех. Поэтому после этого метода не нужно переносить во время имплантации в матку два эмбриона.
aCGH метод анализа эмбриона
Для aCGH анализа эмбриона проводят забор 5–6 клеток от эмбрионов, полученных для ЭКО. Если женщине планируется подсадка в следующем цикле, то эмбрионы замораживают.
Не следует переживать, что aCGH анализ может как–то навредить эмбриону ― анализ совершенно безопасен для него.
Клетки для CGH анализа забирают из трофэктодермы — та часть эмбриона, которая развивается в хорион. Поэтому CGH эмбриона не влияет на его жизнеспособность и дальнейшее развитие.
ДНК полученных клеток анализируют на специально разработанном для этих целей сканере для микро биочипов.
После получения результатов обследования эмбрионы размораживают и делают подсадку эуплоилных эмбрионов, которые обладают нормальным хромосомным набором.
Сколько дней делают анализ aCGH?
Генетический анализ эмбрионов делают примерно 2–3 недели, после чего, как правило, их сразу замораживают. Те эмбрионы, которые благополучно прошли acgh анализ и готовы к подсадке, размораживают и подсаживают пациентке в следующем цикле во время овуляции.
